Bloc 1. La microscòpia òptica.

Tema 2. Conceptes generals.
Unitats més utilitzades en microscòpia. Distància mínima de visió nítida, àngle mínim de visió nítida i distància mínima de resolució. Propietats de les lents. Poder de resolució, distància mínima de resolució, obertura numèrica i distància focal d'una lent. Augment total del microscopi. Camp, horitzontalitat de camp i profunditat de camp. Aberracions de les lents. Correcció de les aberracions.

Tema 3. Microscòpia òptica de camp clar.
Microscopi òptic convencional: part mecànica i part òptica, sistema d'il.luminació complements. Requisits de les mostres a observar. Microscopi binocular, lupa binocular o microscopi estereoscòpic. Microscopi invertit.

Tema 4. Altres modalitats de microscòpia òptica.
Microscòpia de contrast de fases. Microscòpia de camp fosc. Microscòpia de polarització. Microscòpia de contrast interferencial de Nomarski. Microscòpia de fluorescència. Microscòpia confocal.

Tema 5. Mètodes de mesura: micrometria.
Mesura lineal. Mesura de profunditat. Cambres de recompte. Estimació de l'àrea i la superfície. Mesura amb blocs xifrats. Mesura amb analitzadors d'imatge basats en TV.

Tema 6. Mètodes de preparació de mostres per MO.
Preparacions "in vivo". Frotis i seccions. Fixació. Inclusió. Microtomia. Tècniques de coloració. Muntatge.

Tema 7. Fotomicrografia
Equipament per a fotomicrografia. Consideracions per a fer una bona fotomicrografia. Augment de les fotomicrografies.

Tema 8. Videomicroscòpia
Tipus de càmara de vídeo. Adaptar una càmara de vídeo al microscopi. Processat d'imatges.

Bloc 2. La microscòpia acústica.

Tema 9. El microscopi acústic.Característiques generals.Components del microscopi acústic. Utilització del microscopi acústic.

Bloc 3. La microscòpia electrònica.

Tema 10. Microscòpia electrònica de transmissió.
Fonament de la microscòpia electrònica. Parts d'un microscopi electrònic de transmissió (TEM). Complements. Maneig del microscopi electrònic.

Tema 11. Microscòpia electrònica de rastreig.
Principis de la microscòpia electrònica de rastreig. Parts d'un microscopi electrònic de rastreig (SEM). Sistema operatiu. Augment. Profunditat de camp. Distorsió de la imatge.

Tema 12. Processat de mostres per a microscòpia electrònica de transmissió.
Fixació. Amortidors. Deshidratació. Inclusió i imbibició. Ultramicrotomia. Contrastat. Tinció negativa.

Tema 13. Processat de mostres per a microscòpia electrònica de rastreig.
Fixació. Deshidratació. Assecat. Muntatge. Metal.lització.

Tema 14. Altres modalitats de microscòpia electrònica.
Microscòpia electrònica d'alt voltatge (HVEMS). Microscòpia electrònica de voltatge intermedi (IVEM). Microscòpia electrònica de transmissió-rastreig (STEM).

Tema 15. Microanàlisi.
Consideracions generals. Espectròmetre de dispersió d'energies (EDS). Espectròmetre de dispersió de longituds d'ona (WDS). Microanàlisi de pèrdua d'energia (EELS).

Tema 16. Criotècniques.
Objectiu. Criogens o líquids criogèncis. Mètodes de criofixació. Precaucions. Crioultramicrotomia. Criosubstitució. Criofactura.

Tema 17. Tècniques citoquímiques i immunocitoquímiques.
Consideracions generals. Preparació de mostres: mètodes pre-inclusió i post-inclusió. Mètodes d'obtenció d'anticossos específics contra un antigen: tècniques directes i indirectes.

Les pràctiques consten de 10 sessions que s'estructuren de la forma següent:

Sessió I. Processament de mostres per a microscòpia òptica (MO) i per a microscòpia electrònica (ME).

Sessió II. Visita al Servei de Microscòpia de la Universitat de Girona: MO de camp clar, MO de camp fosc, MO de contrast de fases, MO de contrast interferencial de Nomarski i MO de fluorescència.

Sessió III. Visita al Servei de Microscòpia de la Universitat de Girona: ME de transmissió (TEM) i ME de rastreig (SEM).

Sessió IV. Tinció de teixits animals amb Blau de Toluïdina.

Sessió V. Tinció de teixits animals amb Hematoxilina-Eosina.

Sessió VI. Tinció de teixits animals segons el mètode tricròmic de Mallory.

Sessió VII. Tinció de teixits animals segons el mètode tricròmic de van Gieson i el mètode histoquímic de l'Orceïna.

Sessió VIII. Tinció de teixits animals segons el mètode histoquímic de Schiff.

Sessió IX. Aplicació d'un mètode informàtic de mesura d'estructures animals.

Sessió X. Exposició de resultats.

La bibliografia a la biblioteca

- DE JUAN HERRERO, J. 2000. ¿De qué estan hechos los organismos?. El nacimiento de la mirada histológica. Publicacions de l'Universitat d'Alacant. España.

- DURFORT, M.; VILARÓ, S.; RENAU, J. i SERRATOSA, J. 1991. Técnicas de inmunocitoquímica en microscopia electrónica. Barcelona. Publicacions Universitat de Barcelona.

- DYKSTRA, M.J. 1992. Biological electron microscopy theory, techniques, and troubleshooting. New York. Plenum Press.

- FLEGLER, S.L.; HECKMAN, J.W., Jr. and KLOMPARENS, K.L. 1997. Scanning and Transmission Electron Microscopy: An Introduction. Oxford University Press. UK.

- GOLDSTEIN, J.I. 1992. Scanning electron microscopy and X-ray microanalysis a text for biologists, materials scientists, and geologists. 2nd ed. New York. Plenum Press.

- HAYAT, M.A. 1989. Principles and techniques of electron microscopy biological applications. 3th ed. Houndmills. MacMillan Press.

- LACEY, A.J. 1989. Light microscopy in biology: A practical approach. Oxford University Press, UK. IRL Press.

- LACEY, A.J. 1999. Light microscopy in biology: A practical approach. 2nd ed. Oxford University Press; UK. IRL Press.

- NEWMAN, R.G.; HOBOT, J.A. 2001. Resin microscopy and on-section immuno-cytochemistry. Springer-Verlag.

- OJEDA, J.L. 1997. Métodos de Microscopía Electrónica de Barrido en Biología. Servicio de Publicaciones de la Universidad de Cantabria. España.

- POTTU-BOUMENDIL, J. 1989. Microscopie électronique. Principes et métodes de préparation. Paris. Éditions INSERM.

- RAWLINS, D.J. 1992. Light microscopy. Oxford. Bios.

- RENAU, J. y MEGÍAS, L. (eds.). 1998. Manual de Técnicas de Microscopía Electrónica. Aplicaciones Biológicas (Fundamentos y Procedimientos). Editorial Universidad de Granada. España.

- Royal Microscopical Society. 1994. -MICROSCOPY HANDBOOKS:20. The Operation of Transmission and Scanning Electron Microscopes. BIOS Scientific Publishers.

- Royal Microscopical Society. 1994. - MICROSCOPY HANDBOOKS:23. Basic Measurement Techniques for Light Microscopy. BIOS Scientific Publishers.

- RUBBI, C.P. 1994. Light microscopy: essential data. Chichester. Wiley and Sons.

- SAURET, M. 1984. Microscòpia. Barcelona. Publicacions i Edicions de la Universitat de Barcelona.

- WANG, Y. and LANSING TAYLOR, D. 1989. Fluorescence microscopy of living cells in culture. Vol. 1 i 2. San Diego. Academic Press.

L'avaluació de l'assignatura es farà a través d'una prova objectiva escrita de caràcter individual, que constarà de preguntes tipus test i esquemes a completar. Per a cada pregunta tipus test hi haurà quatre respostes possibles de les quals només una serà correcta. Per a la correcció s'aplicarà la fórmula següent: nombre de repostes correctes - 1/4 del nombre de respostes incorrectes /10.

Per a les sessions teòriques: Recull de fotocòpies de les transparències de classe que es pot adquirir al Sevei de Fotocòpies de la Facultat de Ciències de la Universitat de Girona (OPCIONAL).

Per a les sessions pràctiques, cada estudiant ha de portar:

1. El guió de pràctiques que es pot adquirir al Servei de Fotocòpies de la Facultat de Ciències de la Universitat de Girona.

2. Una bata de laboratori.

3. Una caixa de cobreobjectes (per a cada dos estudiants).