Estudia

• Conèixer les modalitats de microscòpia més frequentment utilitzades en el camp de la biomedicina.
• Conèixer les tècniques de preparació de mostres biològiques.
• Conèrixer programes informàtics d'anàlisi i tractament d'imatges.

1. Tema 1. Antedecents històrics de la microscòpia.

2. Bloc 1. La microscòpia òptica.

3. Tema 2. Conceptes generals.

4. Unitats més utilitzades en microscòpia. Distància mínima de visió nítida, àngle mínim de visió nítida i distància mínima de resolució. Propietats de les lents. Poder de resolució, distància mínima de resolució, obertura numèrica i distància focal d'una lent. Augment total del microscopi. Camp, horitzontalitat de camp i profunditat de camp. Aberracions de les lents. Correcció de les aberracions.

5. Tema 3. Microscòpia òptica de camp clar.

6. Microscopi òptic convencional: part mecànica i part òptica, sistema d'il.luminació i complements. Requisits de les mostres a observar. Microscopi binocular, lupa binocular o microscopi estereoscòpic. Microscopi invertit.

7. Tema 4. Altres modalitats de microscòpia òptica.

8. Microscòpia de contrast de fases. Microscòpia de camp fosc. Microscòpia de polarització. Microscòpia de contrast interferencial de Nomarski. Microscòpia de fluorescència. Fluorocroms. Tècniques d'immunomarcatge. Microscòpia confocal.

9. Tema 5. Mètodes de mesura: micrometria.

10. Mesura lineal. Cambres de recompte. Estimació de l'àrea i la superfície. Mesura amb blocs xifrats. Mesura amb analitzadors d'imatge basats en TV.

11. Tema 6. Mètodes de preparació de mostres per MO.

12. Preparacions "in vivo". Frotis i seccions. Fixació. Inclusió. Microtomia. Tècniques de coloració. Muntatge.

13. Bloc 2. La microscòpia acústica.

14. Tema 7. El microscopi acústic.Característiques generals.Components del microscopi acústic. Utilització del microscopi acústic.

15. Bloc 3. La microscòpia electrònica.

16. Tema 8. Microscòpia electrònica de transmissió.

17. Fonament de la microscòpia electrònica. Parts d'un microscopi electrònic de transmissió (TEM). Complements. Maneig del microscopi electrònic.

18. Tema 9. Microscòpia electrònica de rastreig.

19. Principis de la microscòpia electrònica de rastreig. Parts d'un microscopi electrònic de rastreig (SEM). Sistema operatiu. Augment. Profunditat de camp. Distorsió de la imatge.

20. Tema 10. Processament de mostres per a microscòpia electrònica de transmissió.

21. Fixació. Amortidors. Deshidratació. Inclusió i imbibició. Ultramicrotomia. Contrastat. Tinció negativa.

22. Tema 11. Processament de mostres per a microscòpia electrònica de rastreig.

23. Fixació. Deshidratació. Assecat. Muntatge. Metal.lització.

24. Tema 12. Altres modalitats de microscòpia electrònica.

25. Microscòpia electrònica d'alt voltatge (HVEMS). Microscòpia electrònica de voltatge intermedi (IVEM). Microscòpia electrònica de transmissió-rastreig (STEM).

26. Tema 13. Microanàlisi.

27. Consideracions generals. Espectròmetre de dispersió d'energies (EDS). Espectròmetre de dispersió de longituds d'ona (WDS). Microanàlisi de pèrdua d'energia (EELS).

28. Tema 14. Criotècniques.

29. Objectiu. Criògens o líquids criogènics. Mètodes de criofixació. Precaucions. Crioultramicrotomia. Criosubstitució. Criofactura.

30. Les pràctiques consten de 10 sessions que s'estructuren de la forma següent:

31. Sessió I. Processament de mostres per a microscòpia òptica (MO) i per a microscòpia electrònica (ME).

32. Sessió II. Visita al Servei de Microscòpia de la Universitat de Girona: MO de camp clar, MO de camp fosc, MO de contrast de fases, MO de contrast interferencial de Nomarski i MO de fluorescència.

33. Sessió III. Visita al Servei de Microscòpia de la Universitat de Girona: ME de transmissió (TEM) i ME de rastreig (SEM).

34. Sessió IV. Tinció de teixits animals amb la tinció d'Hematoxilina-Eosina i el mètode tricròmic de Mallory.

35. Sessió V. Tinció de teixits animals amb el mètode tricròmic de van Gieson i el mètode histoquímic de l'Orceïna.

36. Sessió VI. Tinció de teixits animals amb el mètode histoquímic de blau Alcià-PA-Schiff.

37. Sessió VII. Mesures d'estructures cel·lulars i tissulars al MO.

38. Sessions VIII i IX. Aplicació d'un mètode programa informàtic de simulació dels paràmetres de la MO.

39. Sessió X. Exposició de resultats.

• Bracegirdle, Brian, Bradbury, Savile (cop. 1995). Modern photoMICROgraphy. Oxford: Bios Scientific Publishers Royal Microscopical Society.
• Bozzola, John J, Russell, Lonnie Dee (cop. 1999). Electron microscopy, : principles and techniques for biologists (2nd ed). Sudbury, MA [etc.]: Jones and Bartlett.
• Herman, Brian (cop. 1998). Fluorescence microscopy (2nd ed). Oxford: Bios Scientific Publishers.
• Müller, Michiel (cop. 2002). Introduction to confocal fluorescence microscopy. Maastricht: Shaker.
• Dykstra, Michael J (1992). Biological electron microscopy, : theory, techniques, and troubleshooting. New York [etc.]: Plenum Press.
• Técnicas de inmunocitoquímica en microscopia electrónica (1991). Barcelona: Publicacions Universitat de Barcelona.
• Light microscopy in biology, : a practical approach (cop. 1999) (2nd ed). Oxford [etc.]: Oxford University Press.
• Rawlins, David J (1992). Light microscopy. Oxford: Bios [etc.].
• Rubbi, C.P (1994). Light microscopy, : essential data. Chichester [etc.]: Wiley & Sons.

Activitats d'avaluació:

Tan en primera com en segona convocatòria la qualificació final de l'assignatura resulta de l'avaluació dels continguts teòrics i dels continguts pràctics en la proporció següent: 60% continguts teòrics i 40% continguts pràctics.
Per a l’avaluació de la part teòrica es farà un examen amb preguntes test i tres preguntes curtes. Pel que fa a les pràctiques, que valen un 40%, s’avaluen mitjançant un examen test (que val el 20%), l’ACME (10%) i l’exposició de pràctiques (10%). Als repetidors us aconsellem que les torneu a repetir, però si no teniu l’opció de venir només els dies de les tincions (dijous i divendres de la primera setmana i dilluns de la següent) i fer l’exposició, de manera que pugueu tenir la nota de l’exposició.
Pel que fa als tests de teoria i de pràctiques, per a cada pregunta hi haurà quatre respostes possibles de les quals només una serà correcta. Per a la correcció s'aplicarà la fórmula següent: nombre de repostes correctes - 1/4 del nombre de respostes incorrectes /10.

Les sessions teòriques i les sessions pràctiques es desenvoluparan amb suport audiovisual (transparències, diapositives i videos)i informàtic, incentivant la participació dels estudiants.
Per a les sessions teòriques es recomana el recull de fotocòpies de les transparències de classe que es pot adquirir al Sevei de Fotocòpies de la Facultat de Ciències de la Universitat de Girona.
Per a les sessions pràctiques, cada estudiant ha de portar:
1. El guió de pràctiques que es pot adquirir al Servei de Fotocòpies de la Facultat de Ciències de la Universitat de Girona.
2. Una bata de laboratori.
3. Una caixa de cobreobjectes (per a cada dos estudiants).